biodatacorp 105997說明書

UPTT™ 試劑

部分凝血活酶時間測定試劑（非活化）

內(nèi)源性血漿凝固的接觸激活

貨號：105997

產(chǎn)品描述

UPTT 試劑是緩沖兔腦磷脂的凍干制劑，標準化磷脂濃度≤0.1%。UPTT 試劑不含活化化合物。

預期用途

UPTT 試劑預期用于進行（非活化）體外部分凝血活酶時間 (PTT) 試驗。本試驗檢測了器械或浸提液對貧血小板或無血小板血漿 1,2 或某些血漿凝血因子缺乏的內(nèi)源性凝血途徑的激活作用。1,2,3,4

原理

全血暴露于異物后，在不存在 Ca + + 的情況下發(fā)生接觸活化。4,5,6 UPTT 通過檢測血凝塊形成時間，測量通過內(nèi)源性途徑參與血漿凝血活酶生成的血漿因子。7.8

應一式三份運行試驗。將暴露于試驗器械后的結(jié)果與未處理血漿和陰性對照進行比較。

注意事項

UPTT 試劑不用于人類或動物診斷試驗或程序。

在整個試劑制備、樣本采集、樣本制備和分析過程中遵守標準預防措施。9

根據(jù)實驗室政策處置銳器和生物廢物。

提供的材料

UPTT 試劑 20 x 3.0 mL

試劑儲存

凍干 UPTT 試劑-在 2-8 ℃ 下儲存，直至失效日期。復溶 UPTT 試劑在 2-8 ℃ 下儲存于密封的原始容器中時，可穩(wěn)定 7 天。

需要但未提供的材料

1. 純化水，pH 5.3-7.2（蒸餾、去離子或試劑級）

2. 移液器（10.0、3.0 和 0.1 mL 容量）。

3. 氯化鈣，0.025 M (C/N 100989)

4. 檸檬酸鈉，0.11M (C/N 100994)

5. 凝血質(zhì)控血漿

復溶

復溶前將小瓶加熱至室溫。

1. 輕敲小瓶，去除粘附在膠塞上的材料

2. 取下鋁密封件

3. 取下瓶塞，用 3.0 mL 純化水復溶小瓶內(nèi)容物。

4. 更換塞子，倒置小瓶，充分混合內(nèi)容物。使用前靜置至少 15 min，以確保內(nèi)容物*再水化。

復溶后，UPTT 在 2-8 ℃ 下于密封的原始容器中儲存時可穩(wěn)定 7 天。

試驗血漿的采集和制備

用于 UPTT 的供試樣本必須是采用抗凝全血制備的無血小板或貧血小板血漿。2、11、12

標本采集

應小心采血。一旦采血裝置中可見血液，松開止血帶。避免停滯、溶血、組織液污染或接觸玻璃。

真空標本采集管技術（推薦）12

1. 使用獲批用于實驗室標本的帶翼針采集裝置

2. 將血液采集至含有 0.11M 枸櫞酸鈉抗凝劑的塑料真空標本采集管中

部分凝血活酶時間測定試劑（非活化）

內(nèi)源性血漿凝固的接觸激活

105997

3. 輕輕顛倒試管 4-5 次，混勻標本

注：驗證使用的抗凝劑類型和濃度。顏色頂部不隨檸檬酸鹽濃度的不同而變化。

注射器技術（替代程序）13

1. 使用獲批用于實驗室標本的帶翼針采集裝置

2. 用塑料注射器抽取 9.0 mL 血液。避免過度抽吸。

3. 從收集裝置中取出針頭

4. 立即輕輕將血液分配至聚丙烯管中，該管含有 1.0 mL 0.11M 檸檬酸鈉（血液與抗凝劑比例為 9:1）

5. 蓋上管蓋，輕輕顛倒 4-5 次，混勻。

6. 試驗前，將樣品在室溫下多保存兩小時。

樣品制備

血小板功能離心機

1. 將樣本放入 PDQ

2. 選擇 PFP 設置

3. 按下開始

臺式離心機：貧血小板血漿制備 12,14,15,16

1. 將標本放入離心機

2. 以 2500 xg 離心標本 15 min。

收獲樣品

1. 使用塑料移液管

2. 小心移除貧血小板血漿；不得干擾血沉棕黃層。

3. 將樣本轉(zhuǎn)移至塑料管和蓋上

4. 檢測前，樣品可在 (15-28 °C) 下儲存多 2 小時

• 應根據(jù)實驗室政策使用丟棄管。

• 根據(jù)標本的紅細胞壓積，調(diào)整標本體積，使血液抗凝劑比例為 9:1。紅細胞壓積需要調(diào)整

<30% or >55%.7,12,17

• 在操作過程中的任何時間點，請勿將全血標本或供試品暴露于玻璃容器中。14,16

• 請勿對可見溶血、黃疸或脂血樣本進行 UPTT。12

測試程序儀器

部分凝血活酶時間終點可通過手動凝血方法和大多數(shù)凝血分析儀檢測。分析儀試驗方法與用于進行活化部分凝血活酶時間試驗 (aPTT) 的方法相同。按照生產(chǎn)商說明進行試驗。必須使用實驗室建立的 UPTT 參考范圍。10

• 所有試驗均應重復進行三次。

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品。

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品。

• 必須精確控制待評價器械與試驗血漿接觸的時間。

手冊

1. 移取 0.1 mL 供試或?qū)φ昭獫{至試驗比色皿中，并在 37 ℃ 下孵育血漿 2 min。

2. 在 37 ℃ 下預孵育 0.025 M 氯化鈣。

3. 移取 0.1 mL UPTT 試劑，置于含有血漿的試驗比色皿中。

4. 將血漿/試劑混合物在 37 ℃ 下孵育 2 至 5 min，或按照方案規(guī)定進行孵育。

5. 加入 0.1 mL 預孵育的氯化鈣，同時啟動計時器。

6. 記錄凝血時間

• 所有試驗均應重復進行三次

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品

• 必須精確控制待評價器械與試驗血漿接觸的時間

質(zhì)量控制

實驗室應遵循普遍接受的質(zhì)量控制規(guī)范。應在檢測的每一天運行質(zhì)控品。

1. 每個供試器械樣品必須使用兩個水平的陰性對照。

2. 每個供試器械樣品必須運行一個陽性對照

如果使用凝血分析儀進行 UPTT，則必須遵循制造商關于正確操作、質(zhì)量控制和維護的說明。

各實驗室應根據(jù)確立的實驗室程序，通過進行重復研究來確定每批 UPTT 試劑和質(zhì)控血漿的驗收限值。與活化部分凝血活酶時間 (APTT) 結(jié)果以與本人所用相同的方式運行比較。

每個實驗室必須確定每批 UPTT 試劑和質(zhì)控血漿的參考范圍和驗收限值。當 UPTT 試劑批號改變時，需要進行 10 次交叉研究。

準確度、精密度和重現(xiàn)性

正常血漿和質(zhì)控品水平 1、2 和 3 的 CV 應小于 5%。

UPTT 檢測結(jié)果的精密度和準確度可能受到許多因素的影響。顯著的方案和實驗室間差異來自用于測量凝血終點的凝血系統(tǒng)的數(shù)量。5,15 可能影響檢測結(jié)果的實驗室內(nèi)變量包括用于試劑復溶的純化水的 pH 值、移液技術、孵育時間和溫度、試劑污染或試劑批號變化。定期進行的 18,19 次定期質(zhì)量控制檢測將有助于識別可能發(fā)生的任何變化并導致錯誤的檢測結(jié)果。

結(jié)果

UPTT 試驗結(jié)果應報告為凝血終點（秒）。應一式三份運行供試品和對照品，并在將其與實驗室確立的參考范圍進行比較之前對結(jié)果取平均值。14,16,17,22

結(jié)果中應包括 p 值，作為檢驗有效性的指標。

在統(tǒng)計學上比較未暴露血漿的平均結(jié)果與暴露于器械的血漿的結(jié)果。為了通過，器械統(tǒng)計必須具有≥0.05 的 p 值。

預期值

正常血漿：> 60 秒水平 1：> 60 秒

水平 2：> 90 秒

水平 3：> 120 秒

注：當在光電分析儀上使用正常質(zhì)控品血漿進行測試時，UPTT 結(jié)果將大于 60 秒。接觸激活將縮短該時間。由于分析儀和方案之間的操作差異，每個實驗室必須建立 UPTT 的參考范圍。實驗方案、樣品制備和終點檢測方法可能會影響試驗結(jié)果。

局限性

1. 溶血、黃疸或脂血血漿可能產(chǎn)生錯誤的檢測結(jié)果。

a. 會影響檢測結(jié)果的溶血、黃疸或脂血濃度取決于分析儀。17,21

2. 冷凍血漿樣本可能導致錯誤的檢測結(jié)果。

• 血液與抗凝劑的比例不正確可能導致虛假的檢測結(jié)果。對于紅細胞壓積值高于 53% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例降低，對于紅細胞壓積值低于 25% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例增加。2,7

參考文獻

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產(chǎn)品可用性

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